Ферменты - специфические белки, выполняющие в организме роль биологических катализаторов. Ферменты содержатся во всех клетках организма, где их концентрация значительно выше, чем в плазме крови. Нормальные уровни активности ферментов в сыворотке крови отражают соотношение между биосинтезом и высвобождением ферментов, а также их клиренсом из кровотока.

Исследования уровня ферментов в клинической практике применяется для решения следующих задач:

Установление диагноза;
Проведения дифференциальной диагностики;
Оценки динамики течения болезни;
Определение эффективности лечения и степени выздоровления.
В клинико-диагностической лаборатории выполняется определения сывороточной активности следующих ферментов:

Амилаза -  фермент, расщепляющий полисахариды. Наиболее богаты этим ферментом поджелудочная и слюнные железы. Определение  активности  амилазы имеет важное значение  в диагностике заболеваний  поджелудочной железы. Повышение активности амилазы в сыворотке крови в 2 раза и более расценивается как симптомы поражения поджелудочной железы. Большей информативностью о функции поджелудочной железы обладает определение активности  амилазы в моче.

Амилаза панкреатическая – это биологически активное вещество, участвующее в процессе метаболизма углеводов. В организме человека большая часть вырабатывается поджелудочной железой. В случае  заболевания поджелудочной железы или блокирования протока между нею и двенадцатиперстной кишкой амилаза панкреатическая начинается выделяться в кровь, свидетельствуя о существовании неблагополучии в состоянии этого важного пищеварительного органа.

Липаза – водорастворимой фермент, который катализирует гидролазу нерастворимых липидных субстратов, помогая переваривать, растворять и функционировать жиры. Липаза вместе с желчью расщепляет жиры и жирные кислоты , жирорастворимые витамины А, Д, Е, К.

АСТ – аспартатаминотрансфераза – фермент, широко распространённый в тканях человека (сердце, печень, скелетная мускулатура, почки, легкие и т.д.). Активность АСТ в крови повышается при ряде заболеваний, особенно при поражении органов и тканей богатых этим ферментом. Наиболее резкие изменения в активности АСТ наблюдаться при поражении сердечной мышцы, при остром гепатите и других тяжелых поражениях клеток печени.

АЛТ – аланинаминотранспортаза – фермент, содержащийся в скелетной мускулатуре, печени, сердце. В миокарде его значительно меньше, чем АСТ. Самых больших концентраций АЛТ достигает в печени. В клинической практике широко применяется одновременное определение АСТ и АЛТ ;  оно несет гораздо больше информации о локализации и глубине поражения, активности каталитического процесса,  позволяет прогнозировать исход заболевания.

Щелочная фосфатаза - фермент, широко распространённый в тканях человека, особенно  в слизистой оболочки кишечника, остеобластов, стенках желчных протоков печени. Увеличение активности ЩФ сопровождает рахит любой этиологии, костное изменения, связанные с гиперпаратириозам. Быстро растет активность фермента при остеогенной саркоме,  метастазах рака в кости, миеломной болезни.

Значительное увеличение активности ЩФ наблюдается при холестазе, у 90% больных первичным раком печени  и при метастазах в печени. Резко возрастает её активность при отравлениях алкоголем на фоне хронического алкоголизма. Она может повышаться при в лекарственных назначения, гепатототксоческий эффект.

Гамма - глутамилтранспептидаза – ГГТ обнаружена в печени, поджелудочной железе, почках.  Изменение её активности в сыворотке крови имеет большое диагностическое значение  при заболевании печени и гепатобилиарного тракта.

ЛДГ – общая лактатдегидрогеназа – наибольшая активность ее обнаружена в почках, миокарде, скелетной мускулатуре и печени. В физиологических  условиях повышенная активность ЛДГ наблюдается  у беременных , у лиц после интенсивный физической нагрузке.

Из патологических состояний повышения активности ЛДГ вызывают инфаркты миокарда, застойные явления в печени, инфаркт лёгкого, миопатия, застой печени или метастаза рака в печени, мигалообластная и гемолитическая анемия и обостренные хронические заболевания почек.

КК- креатинкиназа определение её активности используется для выявления ранней диагностики инфаркта миокарда и цитолитического синдрома при заболеваниях миокарда и скелетной мускулатуры.

КФ - кислая фосфатаза - участвует в реакциях обмена ионов фосфатной кислоты. Наибольшее содержание её обнаруживают в предстательной железы, что используется как очень чувствительный и специфический показатель её патологии. Увеличение активности КФ отмечается при раке предстательной железы, заболеваниях почек, гепатобилатеральной системы, ревматизме, остеопорозе. Уменьшение КФ выявлено при тромбоцитопении. Ферменты обеспечивают существование важнейших процессов жизнедеятельности -  реализация наследственной информации, энергетика, синтез и распад биомолекулы (обмен веществ) изучение их способствует проникновение в суть и сокровенные тайны, того загадочного явления, которое мы называем жизнью. Этим обстоятельствам может быть объяснено пристальное внимание исследователей к проблематике структуры молекулярных механизмов действия ферментов. Ферменты отличаются высокой специфичностью действия, то есть каждый фермент катализирует только определённую химическую реакцию. Для каждого фермента характерно специфическая последовательность расположения аминокислотных остатков. Существенной особенностью является то, что в что в кистах их активность строго контролируется как уровни так и посредством определённых низкомолекулярных соединений субстратов и продуктов их реакции.

Таким образом, молекула фермента характеризуется уникальностью структуры, которая и определяет уникальность её функции.

Существует большое количество методических приемов для определения активности ферментов, различающихся по технике исполнения, специфичности, чувствительности.

Чаще всего для определения применяется фотоэлектроколориметрические методы. В основе этих методов лежат цветные реакции с одним из продуктов действия ферментов.

Спектрафотометрические методы основываются на изменении ультрафиолетового спектра химических веществ, принимающих участие в реакции.

Флюорометрические методы - в основе этих методов  явления флюоресценции, которые заключается в том, что исследуемый объект облучение излучает свет с  более короткой длиной волны. Этот метод является более чувствительным, чем спектрофотометрия. Сравнительно ещё более чувствительными методом является хемилюминесцентный метод с применением люциферин- люциферазной системой.

Ферменты, как и все белки являются относительно неустойчивыми веществами. Они легко подвергаются денатурацией и инактивации. Поэтому при работе с ними надо выполнять определённые требования.

Врач лабораторной диагностики клинико-диагностической лаборатории Александрович Л.Ф.